極小種群野生植物  滇桐組培繁殖技術規(guī)程

標準起草單位：中國科學院昆明植物研究所、云南高黎貢山國家級自然保護區(qū)瀘水管護分局

標準歸口單位：云南省林業(yè)標準化技術委員會

標準編號：DB53/T 1425-2025

標準發(fā)布日期：2025年6月7日

標準實施日期：2025年9月7日

標準制定背景

滇桐（Craigia yunnanensis）是古老的第三紀孑遺植物，具有較高的歷史文化價值，于1921年在中國云南被發(fā)現(xiàn)并命名，屬西南地區(qū)特有物種，列為《中國生物多樣性紅色名錄——高等植物卷》（2020版）瀕危植物，主要分布中國云南中部、東南部、西南部及貴州、西藏，石灰?guī)r季節(jié)性雨林或半常綠季雨林中，是國家重點保護的極小種群野生植物。滇桐樹干通直，樹形優(yōu)美，樹葉紙質(zhì)橢圓形，葉色四季分明，春夏翠綠，秋季轉(zhuǎn)為金黃色或紅褐色；7月聚傘花序2—5朵腋生，花為黃紫色；9至10月蒴果成熟，紅色，5棱形，極具觀賞性。此外，滇桐木質(zhì)輕軟、紋理細膩，可用于制作小型家具和工藝品等。滇桐適應性強，能在石灰?guī)r山地惡劣的環(huán)境中生長，有助于防止水土流失，維護生態(tài)環(huán)境穩(wěn)定，可作為石灰?guī)r地區(qū)重要的生態(tài)修復樹種。據(jù)調(diào)查，目前僅在云南、貴州和西藏發(fā)現(xiàn)21個分布點，500余株存活個體，野外種群數(shù)量稀少且呈零星間斷分布。

2013年起，起草單位開展了滇桐野外生境調(diào)查、種質(zhì)資源收集、繁育試驗研究，經(jīng)過6年實踐探索，成功建立滇桐組織培養(yǎng)育苗技術體系，實現(xiàn)利用現(xiàn)代生物技術促進該物種的苗木擴繁和生產(chǎn)。

以長期科學試驗研究成果，制定滇桐組培繁殖技術規(guī)程標準，為滇桐的無性繁殖提供生產(chǎn)規(guī)范，為促進該瀕危物種種苗的人工擴繁提供技術支撐。

標準內(nèi)容主要結構

（一）范圍

適用于極小種群野生植物滇桐組培繁殖。

標準規(guī)定了滇桐組織培養(yǎng)的基本要求、外植體采集與處理、誘導培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯苗與生根培養(yǎng)、煉苗移栽等技術要求。

（二）組織培養(yǎng)基本要求

培養(yǎng)基配制、消毒、接種操作、接種器械清洗與消毒、接種室及培養(yǎng)室管理執(zhí)行LY/T 1882-2010標準，其中：外植體的消毒及誘導、增殖、生根等環(huán)節(jié)中所涉及的轉(zhuǎn)接、切分均應于超凈工作臺進行。

培養(yǎng)室培養(yǎng)條件：溫度23—30℃，光照強度1000—1500Lux，光照時間每天10小時。

（三）外植體采集與處理

外植體采集。3—5月、9—12月，從生長旺盛、無病蟲害植株的當年生枝條上采集帶芽莖段作為外植體，并記錄外植體母株、采集時間和地點等信息。

保存與運輸。采集的外植體宜當天消毒接種。若需長途運輸，控制在3天內(nèi)，75%酒精擦拭表面后，用干凈的紙巾包裹置于自封袋中，放置冰袋低溫冷藏運輸。

外植體消毒。剪去外植體上葉片，保留葉柄0.3—0.5厘米，剪成1.0—1.5厘米帶芽的莖段，于1%的肥皂液中浸泡10分鐘后用流動的自來水清洗干凈；用75%酒精消毒8—10秒，無菌水沖洗3次后，用10%次氯酸鈉溶液消毒5—6分鐘，再用無菌水沖洗3—5次。

（四）誘導培養(yǎng)

誘導培養(yǎng)基配方。MS 6-BA 0.1—2.0毫克/升 NAA 0.5毫克/升 蔗糖30克/升 瓊脂5克/升，pH5.8。

接種要求。將消毒外植體葉柄和莖段兩端切去0.1—0.2厘米，按照芽生長方向朝上原則，豎直或者傾斜接種于誘導與分化培養(yǎng)基中，每個培養(yǎng)瓶接1個芽或者莖段，誘導腋芽和叢芽生長。

（五）增殖培養(yǎng)

增殖培養(yǎng)基配方。MS 6-BA 0.5—1.0毫克/升 NAA 0.1—0.8毫克/升 蔗糖30克/升 瓊脂5克/升，pH5.8。

接種要求。腋芽和頂芽生長至2—3厘米時，將其切成帶1—2個節(jié)的莖段，接種于增殖培養(yǎng)基，增殖周期50—60天。

（六）壯苗與生根培養(yǎng)

壯苗與生根培養(yǎng)基配方。MS IAA 0.5—1.0毫克/升 IBA 0.5—1.0毫克/升 蔗糖30克/升 瓊脂5克/升，pH5.8。

壯苗與生根培養(yǎng)操作。增殖培養(yǎng)的莖段生長至3—4厘米時，切下生長健壯、形態(tài)正常、帶頂芽、長2—3厘米的莖段進行壯苗與生根培養(yǎng)。

（七）煉苗移栽

組培瓶苗的質(zhì)量要求。植株生長健壯、葉形葉色正常，具3—4片展開葉；株高3—5厘米；根數(shù)量多于3條，根長1—2厘米。

閉瓶煉苗。將組培瓶苗移植于遮光率60%—70%、空氣濕度＜50%的大棚內(nèi)，閉瓶煉苗7—10天，使組培苗適應自然光照和晝夜溫差。

移栽。基質(zhì)按珍珠巖：腐殖土：生紅土1:2:3體積比配制，用多菌靈800倍液噴施基質(zhì)并與土混拌均勻，pH5.8—6.8，覆蓋塑料膜密封消毒7天。準備規(guī)格為6厘米×7厘米栽培容器，將煉苗后的瓶苗取出，洗凈根部培養(yǎng)基，及時栽入容器中，澆透定根水。移栽到大棚后30天內(nèi)，溫度20℃—30℃，遮光率70%—80%，空氣濕度70%—80%，基質(zhì)含水量40%—50%；移栽30天后，逐步增加光照強度，每7天噴施70%甲基托布津可濕性粉劑800倍液1次和全營養(yǎng)素葉面肥500倍液1次，連續(xù)噴施4—5次。

出圃要求。移栽培育1年，苗高≥20厘米，地徑≥0.2厘米。

標準實施意義

標準的發(fā)布實施，為滇桐種苗繁育生產(chǎn)提供了技術規(guī)范，對保護滇桐瀕危物種，促進滇桐種質(zhì)資源保存、遷地保護、種群恢復及利用，維護生物多樣性具有重要意義。

來源：云南省林業(yè)和草原局

作者：云南省林業(yè)標準化技術委員會   中國科學院昆明植物研究所

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